目的:研究高糖诱导的内皮细胞损伤微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化.方法:常规培养的人冠状动脉内皮细胞,利用不同浓度D-葡萄糖溶液(0mmol/L、5 mmoVL、15 mmol/L和25 mmol/L),诱导刺激24 h后分别用CCK-8法和流式细胞术检测其生长活力和凋亡水平.收集细胞总RNA,利用实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miRNA的表达变化,同时利用TargetScan、PicTar等生物信息学预测软件预测可能的靶基因.结果:高糖溶液(25 mmol/L)刺激内皮细胞后,细胞生长活力明显降低,为对照组的67.5 %(P<0.01),凋亡水平为对照组的4.5倍(P<0.01).QRT-PCR结果显示miRNA的表达出现了明显的紊乱,其中miR-451、miR-504、miR-302d、miR-18b*、miR-198、miR-328和miR-517c明显下调,miR-29c、miR-100*、miR-137、miR-660和miR-217明显上调(P<0.05).靶基因预测发现miR-217和miR-451可能调控内皮细胞功能相关的多个基因的表达.结论:在高糖诱导的内皮细胞损伤中,miRNA表达紊乱提示其可能参与内皮细胞功能.
作者:刘宇;曹清心;于曼丽;张必利;石屹城;崔玲;赵仙先
来源:现代生物医学进展 2015 年 15卷 13期