目的:利用前体脂肪细胞株3T3-L1细胞观察mTOR (mammalian target of rapamycin)信号通路中上游调控因子Rheb(Ras homolog enriched in brain)对其分化的影响.方法:利用高表达Rheb的基因重组质粒转染前体脂肪细胞株,3T3-L1.通过蛋白质免疫印迹实验鉴定质粒成功转染细胞后,诱导该细胞脂肪分化.予以分化第8天的3T3-L1细胞油红染色,并检测细胞内甘油三酯的含量.另外,我们用Western blot方法检测脂肪细胞特异性转录因子PPAR-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ)和C/EBP-α(CCAAT-enhancer-binding protein-α)的表达情况来研究Rheb在脂肪细胞分化过程中的作用.结果:我们成功构建了高表达Rheb的3T3-L1细胞株,发现高表达Rheb后可以促进脂滴的生成,油红O染色有显著区别,与对照组相比Rheb高表达组的三酰甘油含量明显升高(P＜0.05);C/EBP-α和PPAR-γ等脂肪细胞特异性的转录因子蛋白表达量与对照组相比也均有升高(P＜0.05).结论:Rheb基因作为mTOR通路上游调控因子,可以促进脂肪细胞的分化.
作者：鲍晶晶；葛欧洋；李璐；林艳；李晓曦；赵子建
来源：现代生物医学进展 2015 年 15卷 22期
