目的:研究携带特异性抑制叉头框蛋白M1 (Forkhead box protein M1,FOXM1)表达的腺病毒(Ad5.shFOXM1)对人涎腺腺样囊性癌(Adenoidcystic carcinoma,ACC)细胞周期的调控、细胞凋亡的影响及其作用机理.方法:根据人FOXM1 mRNA的序列,设计合成针对FOXM1基因的三对shRNA,转染ACC-2细胞系,利用实时荧光定量PCR、Western blot筛选获得最佳干扰片段,并构建入腺病毒载体,利用流式细胞术、MTT、Western blot等检测其对ACC-2细胞周期、细胞凋亡的调控及分子作用.结果:①成功筛选获得了抑制FOXM1表达的shRNA,并构建了特异性抑制ACC-2细胞中FOXM1表达的腺病毒Ad5-shFOXM1;②Ad5-shFOXM1能明显抑制ACC细胞的增殖,并引起ACC-2细胞S期的阻滞(P<0.05);②Ad5-shFOXM1通过下调c-Myc蛋白的表达抑制了细胞的增殖,通过下调P21Cip1,P27Kip1蛋白的表达抑制了ACC-2细胞周期(P<0.05).结论:下调FOXM1的表达能够明显抑制ACC-2细胞周期和ACC-2细胞的增殖.
作者:仇静;张月;陈书兰;刘岚;刘峤峤;张广耘;袁晓
来源:现代生物医学进展 2016 年 16卷 7期