目的:运用干扰腺病毒沉默THP1细胞中SCARF1基因研究其在体外抗烟曲霉中的作用.方法:用灭活的烟曲霉分生孢子(1× 105 CFU/mL)于不同时间点处理THP-1细胞,RT-PCR分别检测SCARF1和TNF-α mRNA的表达;将Ad-siRNA-SCARF1转导细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激24h,通过RT-PCR法检测细胞中TNF-α mRNA表达,Western blot法检测细胞中SCARF1表达以及NF-κB通路相关信号分子的活性.结果:RT-PCR证实烟曲霉孢子刺激能时间依赖性增强THP1细胞中SCARF1和TNF-α表达;Western法证实与Ad-GFP组比较Ad-siRNA-SCARF1组SCARF1的表达量显著降低(P＜0.05),沉默效率为71％;与Ad-GFP组比较,Ad-GFP+Af组NF-κB亚单位p65的磷酸化水平明显升高(P＜0.05),在Ad-siRNA-SCARF1 +Af组,磷酸化p65的产生明显减少,SCARF1沉默后细胞因子TNF-α的分泌明显减少.结论:烟曲霉孢子刺激能诱导巨噬细胞SCARF1的表达增加,诱导信号分子NF-κB的活化,导致相应的细胞因子分泌增加,从而在巨噬细胞抗烟曲霉中发挥作用.
作者：鄢雯；李囡；刘立新；夏山；刘扬
来源：现代生物医学进展 2016 年 16卷 25期
