目的:探讨大黄素对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞 (HK-2) 间质转分化的影响.方法:不同浓度大黄素分别作用于TGF-β1诱导HK-2细胞24 h和48 h, 通过细胞增殖实验确定最佳大黄素最佳给药浓度.TGF-β1诱导HK-2细胞24 h后收集细胞用于免疫印迹Western blot和实时荧光定量PCR (RT-PCR) 分析.Western印迹法分别检测纤维化相关蛋白Collagen IV的表达, 和肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化关键蛋白α-SMA和E-Cadherin的表达;RT-PCR法检测肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化关键蛋白α-SMA的表达.结果:由细胞增殖实验结果表明40μM大黄素是最佳给药浓度.Western结果表明, 与模型组相比, 大黄素组下调纤维化相关蛋白Collagen IV的表达, 大黄素组与模型组蛋白差异有统计学意义 (P<0.05).与模型组相比, 大黄素组下调α-SMA蛋白表达水平, 而上调E-Cadherin蛋白表达, 差异有统计学意义 (P<0.05).RT-PCR结果表明, 与模型组相比, 大黄素组降低α-SMA m RNA的含量, 大黄素组与模型组α-SMA m RNA含量差异有统计学意义 (P<0.05).结论:大黄素可通过抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞间质转分化, 从而发挥延缓肾间质纤维化的过程.
作者:窦芳;丁一;郭奇彦;王文军;简宇凡;赵先;王婧雯;文爱东
来源:现代生物医学进展 2018 年 18卷 21期