为了延长G-CSF半衰期,利用甲醇酵母表达重组人血清白蛋白融合的集落细胞刺激因子(rHSA-G-CSF).用PCR方法从人胎肝cDNA文库扩增出HSA cDNA序列,hG-CSFcDNA序列从大肠表达载体中酶切获取.将HSA和hG-CSF两片段连接后,克隆到酵母分泌型表达载体pGENYK中,酶切线性化后原生质体转化导入酵母细胞进行整合.工程菌经发酵罐培养表达,层析法分离纯化融合蛋白.纯化的融合蛋白经Western印迹分析表明具有HSA和G-CSF的免疫原性,体外生物学活性分析表明,同等尔数的融合表达产物的活性为E.coli表达G-CSF单体的活性的50
作者：王昌梅；王同映；杨志愉；单剑峰；刘晓妮；马国昌；戎亚雯；方井晋；黄岩山；周金宝
来源：中国生物工程杂志 2006 年 26卷 12期
