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利用PCR拼接技术,合成含单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白G(gG2)抗原表位(氨基酸序列第561~578位)的片段,并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段,克隆入pET-KDO表达载体进行原核表达.经IPTG诱导后,高效表达出分子量大小约为39kDa的融合蛋白,经Western blot检测具有良好的抗原性.表达的融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析纯化,得到双拷贝gG2(561~578aa)目的蛋白,经ELISA检测具有良好的灵敏度和特异性.该重组抗原的构建和表达可用于HSV-2特异性血清学诊断的研究.

作者:王晓红;卢海蓉;章刚;陈少娟;黄德新;李凌云;林枫

来源:中国生物工程杂志 2007 年 27卷 9期

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作者:
王晓红;卢海蓉;章刚;陈少娟;黄德新;李凌云;林枫
来源:
中国生物工程杂志 2007 年 27卷 9期
标签:
人单纯疱疹病毒 糖蛋白G 抗原表位
利用PCR拼接技术,合成含单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白G(gG2)抗原表位(氨基酸序列第561~578位)的片段,并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段,克隆入pET-KDO表达载体进行原核表达.经IPTG诱导后,高效表达出分子量大小约为39kDa的融合蛋白,经Western blot检测具有良好的抗原性.表达的融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析纯化,得到双拷贝gG2(561~578aa)目的蛋白,经ELISA检测具有良好的灵敏度和特异性.该重组抗原的构建和表达可用于HSV-2特异性血清学诊断的研究.