人白介素12亚基p40和p35基因串联在毕赤酵母中的表达及表达产物活性分析-临床诊疗知识库

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作者：

周鹤峰；邵敏；孙伟；刘银花；李官成；葛正龙

来源：

中国生物工程杂志 2008 年 28卷 3期

标签：

人白细胞介素12 毕赤酵母分泌表达活性分析

利用毕赤酵母系统表达有活性的人单链白细胞介素12(hscIL-12),PCR法从质粒pBI121-IL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建重组表达载体pPIC9K-hscIL-12,SacI线性化后,PEG1000法转化毕赤酵母GS115,经G418筛选和菌落PCR鉴定,经甲醇诱导,hscIL-12在酵母中获得分泌表达,表达产物经Western blot检测,显示该蛋白相对分子质量为70kDa,可与鼠抗人IL-12单克隆抗体特异性结合;定量分析结果表明,重组酵母培养上清中hscIL-12约占总蛋白的26

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