病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ(viral macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码,前期研究证明了vMIP-ⅡN端21肽(NT21 MP)选择性的阻断趋化因子CXCR4,从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性.通过化学合成法获得编码vMIP-ⅡN末端的基因序列,与pGEX-KG(克隆位点的N-端有谷胱甘肽转移酶GST标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白GST-NT21MP主要在细菌裂解液上清中表达,可溶性部分经亲和层析、超滤、快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography,FPLC)纯化获得高纯度的GST-NT21 MP蛋白.利用Transwell趋化试验测定GST-NT21MP的活性.结果显示,重组蛋白GST-NT21MP能够抑制乳腺癌细胞SK-BR-3的趋化活性,可作为治疗乳腺癌转移的潜在性靶向药物.
作者:杨清玲;杨志峰;高艳军;陈昌杰
来源:中国生物工程杂志 2010 年 30卷 9期