肿瘤坏死因子alpha的拮抗剂是治疗多种炎症性自身免疫疾病的首选,但抗体类拮抗物因副作用明显而使用受限,尤其是机体内抗抗体的产生,严重影响治疗效果和药物代谢.而肽类物除免疫原性低之外,和小分子相比也有更低的毒性和更强的靶标特异性.使用7肽和12肽两种M13噬菌体展示库筛选TNFα拮抗肽,以分析7肽和12肽分别作为TNFα拮抗肽的亲和性与功能性.经过3～4轮的筛选和验证,得到2条7肽序列和2条12肽序列.利用ELISA方法检测合成肽与TNFα结合的亲和性,编号632的7肽亲和性最强,Kd =138nmoL/L;编号636的12肽亲和性稍差,Kd=8.59μmol/L.InsightⅡ软件分别分析632肽和636肽与TNFα二聚体结合,发现632肽与TNFα二聚体结合更加稳定,并且在细胞水平上632肽拮抗TNFα活性功能比636肽更强,有632肽存在的条件下TNFα诱导的L929细胞生存率上升了3倍,而636肽的作用只有2倍.7肽比12肽更适合作为TNFα拮抗肽.
作者：胡昌武；谢君；朱乃硕
来源：中国生物工程杂志 2017 年 37卷 5期
