构建并原核表达Hsp70-HSV2gD融合蛋白.将Hsp70和HSV-2gD蛋白基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1, 构建成重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD, 并测序鉴定.重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD转化大肠杆菌DH5α后, IPTG诱导表达并进行 SDS-PAGE分析.表达产物纯化后做Western blot检测.将其肌注免疫BALB / c小鼠, 检测融合蛋白对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、γ-干扰素产生以及血清中gD IgG水平的影响.表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为118kD处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致.用GST柱得到了纯化的Hsp70-HSV2gD融合蛋白.Western blot证实,表达产物具有良好的活性.GST-Hsp70-gD组蛋白疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其它组(P＜0.05).血清单纯疱疹病毒-2gD蛋白的抗体水平高于其它组(P＜0.05).
作者：樊建勇；杨慧兰；王颖；关蕾
来源：生物工程学报 2006 年 22卷 6期
