目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白D(gD),以热休克蛋白70(Hsp70)为载体,构建pVAXHsp70-HSV2gD DNA疫苗.方法:将Hsp70和HSV-2gD蛋白的基因分别克隆至真核表达载体pVAX,构建成重组质粒pVAX-Hsp70-gD并测序鉴定.重组质粒pVAX-Hsp70-gD转染COS-7细胞,用免疫组化、SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定重组质粒的表达情况.结果:测序证实重组质粒序列正确,表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为92000处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致.免疫组化方法和Western blotting也证明,构建的重组质粒能在COS-7细胞内表达.pVAX-Hsp70-HSV2gD组核酸疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其他组(P＜0.05).结论:成功构建了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,为其进一步的研究打下了基础.
作者：樊建勇；杨慧兰；关蕾；王颖；仕瑶慧
来源：医学研究生学报 2007 年 20卷 4期
