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目的:构建新型的含单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D基因(gD)的卡那霉素抗性真核表达质粒pgD,并探讨其作为DNA疫苗的可能性.方法:通过PCR扩增、酶切、连接及克隆筛选从质粒pET-28a(+)和质粒peDNA3获得新型真核表达质粒载体pcDNAkan.再通过PCR从重组真核表达质粒pcDNA3-gD上扩增出HSV-2精蛋白D全基因序列(gD),最后克隆重组获得含gD的重组质粒pgD.pgD作为DNA疫苗免疫小鼠,观察其对小鼠的免疫效果及保护作用.结果:pgD免疫小鼠后能产生特异性抗体,与对照组相比较具有显著性差异(P<0.01),在HSV-2病毒致死性攻毒实验中,pgD组存活率达75

作者:何方;洪艳;陈勇

来源:中国卫生检验杂志 2008 年 18卷 6期

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作者:
何方;洪艳;陈勇
来源:
中国卫生检验杂志 2008 年 18卷 6期
标签:
单纯疱疹病毒 DNA疫苗 PCR 糖蛋白D
目的:构建新型的含单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D基因(gD)的卡那霉素抗性真核表达质粒pgD,并探讨其作为DNA疫苗的可能性.方法:通过PCR扩增、酶切、连接及克隆筛选从质粒pET-28a(+)和质粒peDNA3获得新型真核表达质粒载体pcDNAkan.再通过PCR从重组真核表达质粒pcDNA3-gD上扩增出HSV-2精蛋白D全基因序列(gD),最后克隆重组获得含gD的重组质粒pgD.pgD作为DNA疫苗免疫小鼠,观察其对小鼠的免疫效果及保护作用.结果:pgD免疫小鼠后能产生特异性抗体,与对照组相比较具有显著性差异(P<0.01),在HSV-2病毒致死性攻毒实验中,pgD组存活率达75