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目的构建、制备I型单纯疱疹病毒糖蛋白D重组质粒DNA疫苗,初步检测其诱导机体产生体液免疫应答的效果,为研制HSV-1新型疫苗奠定基础.方法用PCR的方法从HSV-1病毒基因组中扩增糖蛋白D(glycoprotein D,gD)基因,利用基因重组技术构建重组质粒;将重组质粒体外转染真核细胞COS-7,Westernblotting检测表达产物;于BALB/C小鼠后腿胫前肌注射免疫,0、2周各免疫1次,100μg/次.初次免疫后0、2、4、6周眼眶采血,ELISA间接法检测抗体.结果重组质粒酶切出相应大小片段,经测序证实为HSV-1gD序列.Western blotting证实能够在体外真核细胞中表达.免疫小鼠后,产生特异性抗体,抗体滴度1:2000.结论HSV-1gD重组质粒DNA有可能作为HSV-1的DNA疫苗,用于防治HSV-1感染及其相关疾病.

作者:朱明昭;刘宏伟;刘晓娟;韩晔华;杨宝玲;宋国兴

来源:中国医学科学院学报 2002 年 24卷 1期

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作者:
朱明昭;刘宏伟;刘晓娟;韩晔华;杨宝玲;宋国兴
来源:
中国医学科学院学报 2002 年 24卷 1期
标签:
单纯疱疹病毒 角膜炎 DNA疫苗 糖蛋白D
目的构建、制备I型单纯疱疹病毒糖蛋白D重组质粒DNA疫苗,初步检测其诱导机体产生体液免疫应答的效果,为研制HSV-1新型疫苗奠定基础.方法用PCR的方法从HSV-1病毒基因组中扩增糖蛋白D(glycoprotein D,gD)基因,利用基因重组技术构建重组质粒;将重组质粒体外转染真核细胞COS-7,Westernblotting检测表达产物;于BALB/C小鼠后腿胫前肌注射免疫,0、2周各免疫1次,100μg/次.初次免疫后0、2、4、6周眼眶采血,ELISA间接法检测抗体.结果重组质粒酶切出相应大小片段,经测序证实为HSV-1gD序列.Western blotting证实能够在体外真核细胞中表达.免疫小鼠后,产生特异性抗体,抗体滴度1:2000.结论HSV-1gD重组质粒DNA有可能作为HSV-1的DNA疫苗,用于防治HSV-1感染及其相关疾病.