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为了实现增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)在生防真菌淡紫拟青霉9410菌株中的转化,借助中间质粒pcDNA3.1(-)构建nptII-egfp融合基因的表达载体pUPNGT,然后采用根癌农杆菌介导的转化法将egfp基因转化到淡紫拟青霉9410茵株中.PCR检测和Southern blotting分析结果表明,egfp基因以单拷贝形式整合到淡紫拟青霉9410的基因组中.荧光显微镜观察结果显示,转化子在488 nm光源的激发下能产生绿色荧光.这些结果说明egfp基因已成功转化至淡紫拟青霉9410菌株并获得表达.这些工作可为淡紫拟青霉在不同条件下的防效评价、环境安全评价等提供新的途径和方法.

作者:王阶平;汪家旭;刘凡;潘沧桑

来源:生物工程学报 2010 年 26卷 5期

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王阶平;汪家旭;刘凡;潘沧桑
来源:
生物工程学报 2010 年 26卷 5期
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淡紫拟青霉 增强型绿色荧光蛋白 根癌农杆菌 遗传转化
为了实现增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)在生防真菌淡紫拟青霉9410菌株中的转化,借助中间质粒pcDNA3.1(-)构建nptII-egfp融合基因的表达载体pUPNGT,然后采用根癌农杆菌介导的转化法将egfp基因转化到淡紫拟青霉9410茵株中.PCR检测和Southern blotting分析结果表明,egfp基因以单拷贝形式整合到淡紫拟青霉9410的基因组中.荧光显微镜观察结果显示,转化子在488 nm光源的激发下能产生绿色荧光.这些结果说明egfp基因已成功转化至淡紫拟青霉9410菌株并获得表达.这些工作可为淡紫拟青霉在不同条件下的防效评价、环境安全评价等提供新的途径和方法.