目的:构建艾滋病病毒核心蛋白(gag)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达质粒,观察其在痘苗病毒中共表达结果,研究其意义.方法:利用基因重组技术,将IFNα-2b基因片段插入到gag基因的nt531位点,经脂质体转染与血凝素阴性蚀斑筛选,挑出重组痘苗病毒.经免疫荧光、Western blot 和Dot-ELISA鉴定表达产物.结果:间接免疫荧光实验结果显示,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光.免疫印迹实验与Dot-ELISA结果均显示重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的gag/IFNα-2b蛋白.结论:成功地构建了重组真核细胞表达质粒,表达的蛋白具有良好的免疫原性与免疫反应性.
作者:王洪军;王桂君;王继群;王立强;魏安明;孙华;殷震
来源:生物技术 2003 年 13卷 6期