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鸡α干扰素在防御病毒感染及治疗病毒性疾病中起着重要的作用.旨在利用家蚕杆状病毒表达系统研制有活性的鸡α干扰素.首先对鸡α干扰素基因(ChIFN-α)进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,与ORF1629缺损的亲本病毒BmBcmid共转染,纯化重组病毒,再感染家蚕幼虫,收集蚕血淋巴以检测α干扰素基因的表达.Western blot分析结果显示,成功表达出分子量约为19 kD的鸡α干扰素.采用细胞病变抑制法在Vero-VSV*GFP系统中测定表达产物的抗病毒活性.所的表达的鸡α干扰素具有明显的抗病毒活性,活性不低于3.2×105 U/mL.利用杆状病毒载体系统成功地表达了具有抗病毒活性的鸡α干扰素的成熟蛋白,为开发廉价高效的鸡干扰素生物制剂奠定了物质基础.

作者:李田田;杨灵;易咏竹;沈桂芳;张志芳;李轶女

来源:生物技术通报 2014 年 3期

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李田田;杨灵;易咏竹;沈桂芳;张志芳;李轶女
来源:
生物技术通报 2014 年 3期
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鸡α干扰素 家蚕 杆状病毒表达系统 抗病毒活性
鸡α干扰素在防御病毒感染及治疗病毒性疾病中起着重要的作用.旨在利用家蚕杆状病毒表达系统研制有活性的鸡α干扰素.首先对鸡α干扰素基因(ChIFN-α)进行了优化与合成,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,与ORF1629缺损的亲本病毒BmBcmid共转染,纯化重组病毒,再感染家蚕幼虫,收集蚕血淋巴以检测α干扰素基因的表达.Western blot分析结果显示,成功表达出分子量约为19 kD的鸡α干扰素.采用细胞病变抑制法在Vero-VSV*GFP系统中测定表达产物的抗病毒活性.所的表达的鸡α干扰素具有明显的抗病毒活性,活性不低于3.2×105 U/mL.利用杆状病毒载体系统成功地表达了具有抗病毒活性的鸡α干扰素的成熟蛋白,为开发廉价高效的鸡干扰素生物制剂奠定了物质基础.