干扰素在畜牧养殖业中可以用于病毒性传染病的治疗和疫苗免疫效力的提高,用杆状病毒表达系统在家蚕中表达了猪γ干扰素。根据已发表的序列对猪γ干扰素基因的密码子进行优化并合成,将其克隆到杆状病毒转移载体 pVL1393上,与BmBacmid 病毒基因组 DNA 共转染 BmN 细胞系,获得重组病毒,猪γ干扰素基因位于重组 BmNPV 病毒的多角体基因启动子下游。用该重组病毒感染家蚕获得含有猪γ干扰素的表达产物。Western blotting 检测到表达产物中的猪γ干扰素,用微量细胞病变法利用干扰素抑制 VSV-GFP 感染 VERO 细胞的方法来测定干扰素活性,结果显示干扰素效价可以达到6×105 IU/mL 以上。在家蚕幼虫体内成功表达并获得了有活性的猪γ干扰素。
作者:刘兴健;李皓洋;胡小元;张志芳;易咏竹;李轶女
来源:生物技术通报 2016 年 1期