目的 在Vero细胞中表达牛干扰素γ基因,并对其抗病毒活性进行鉴定.方法 将牛干扰素γ全基因克隆至pcDNA3.1(+)载体,构建重组表达质粒,经PCR及双酶切鉴定,将鉴定正确的阳性质粒通过脂质体法转染Vero细胞,分别采用间接免疫荧光和Western blot法检测细胞转染效率和干扰素γ蛋白的表达,采用细胞病变抑制试验检测其抗病毒活性.结果 间接免疫荧光显示绿色荧光,表明牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中得到表达,转染效率约为50％;Western blot检测可见相对分子质量约为22 000的目的条带,进一步验证了该蛋白的表达；细胞病变抑制试验显示细胞病变明显减少,表明表达的干扰素γ蛋白具有明显的抗病毒活性.结论 成功在Vero细胞中表达了牛干扰素γ蛋白,其具有明显的抗病毒作用.
作者：宋佰芬；冯振月；孙虎男；马金柱；曹宏伟；崔玉东
来源：中国生物制品学杂志 2013 年 26卷 8期
