在毕赤酵母中分泌表达重组人白细胞介素-1α（rhIL-1α），优化rhIL-1α的发酵工艺及纯化方法，以获得高表达、高纯度具有生物学活性的rhIL-1α。通过PCR扩增获得hIL-1α基因，构建其真核表达载体pPICZαA/hIL-1α，电转化至毕赤酵母X-33，用PCR和SDS-PAGE方法筛选高效表达rhIL-1α的工程菌株并进行Western blot鉴定，DEAE弱阴离子离子交换层析一步纯化表达产物，并用MTT法初步检测其对人肝癌细胞7402的生物学作用。rhIL-1α在摇瓶规模下，经甲醇诱导4 d后表达量约为30 mg/L。Western blot检测rhIL-1α的特异性结合，获得纯度约95
作者：李斌；许晓亚；杨刚刚；崔晴晴；杨亚娟；徐存拴
来源：生物技术通报 2015 年 9期
