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目的:制备针对结核分枝杆菌FurB蛋白的单克隆抗体(mAb)并分析其特性.方法:利用Ecoli DH5α表达含有6×His的融合蛋白FurB;采用小鼠腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜的方法免疫小鼠,然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb,用ELISA法初步鉴定其特异性位点和相对亲和力.结果:获得了高表达的融合蛋白,经SDS-PAGE分析,在相对分子质量15.0×103处有特异的目的蛋白条带.用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了抗FurB mAb.结论:所获得的抗FurB mAb效价高、特异性强,为进一步研究FurB在结核分枝杆菌铁调控和致病过程中的作用提供了有效工具.

作者:姜泓;高雪;张海;李元;徐志凯;薛莹

来源:生物技术通讯 2007 年 18卷 1期

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作者:
姜泓;高雪;张海;李元;徐志凯;薛莹
来源:
生物技术通讯 2007 年 18卷 1期
标签:
结核分枝杆菌 FurB蛋白 单克隆抗体
目的:制备针对结核分枝杆菌FurB蛋白的单克隆抗体(mAb)并分析其特性.方法:利用Ecoli DH5α表达含有6×His的融合蛋白FurB;采用小鼠腹股沟皮下包埋硝酸纤维素膜的方法免疫小鼠,然后进行细胞融合、克隆化制备抗FurB mAb,用ELISA法初步鉴定其特异性位点和相对亲和力.结果:获得了高表达的融合蛋白,经SDS-PAGE分析,在相对分子质量15.0×103处有特异的目的蛋白条带.用该融合蛋白免疫小鼠后,获得了抗FurB mAb.结论:所获得的抗FurB mAb效价高、特异性强,为进一步研究FurB在结核分枝杆菌铁调控和致病过程中的作用提供了有效工具.