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目的:应用重组噬菌体抗体库技术制备抗B型肉毒毒素Fab抗体.方法:用重组B型肉毒毒素重链C端片段(BoNTB/Hc)免疫BALB/c小鼠,从其脾淋巴细胞扩增免疫球蛋白Fd段和κ链基因,克隆至表达载体pComb3中,并将抗体Fab段表达于噬菌体表面,建立容量为5.96×106cfu的噬菌体抗体库.以BoNTB/Hc为抗原对所建抗体库进行4轮亲和筛选,获得与B型肉毒毒素特异性结合的克隆,并进行序列测定.结果:构建了抗B型肉毒毒素Fab抗体库,筛选出特异性克隆1个.结论:从鼠源噬菌体免疫抗体库中初步获得了特异性抗B型肉毒毒素的Fab抗体.

作者:杨秀清;王慧;史晶;侯晓军;包士中;荫俊

来源:生物技术通讯 2007 年 18卷 4期

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作者:
杨秀清;王慧;史晶;侯晓军;包士中;荫俊
来源:
生物技术通讯 2007 年 18卷 4期
标签:
B型肉毒毒素 Fab 噬菌体抗体库
目的:应用重组噬菌体抗体库技术制备抗B型肉毒毒素Fab抗体.方法:用重组B型肉毒毒素重链C端片段(BoNTB/Hc)免疫BALB/c小鼠,从其脾淋巴细胞扩增免疫球蛋白Fd段和κ链基因,克隆至表达载体pComb3中,并将抗体Fab段表达于噬菌体表面,建立容量为5.96×106cfu的噬菌体抗体库.以BoNTB/Hc为抗原对所建抗体库进行4轮亲和筛选,获得与B型肉毒毒素特异性结合的克隆,并进行序列测定.结果:构建了抗B型肉毒毒素Fab抗体库,筛选出特异性克隆1个.结论:从鼠源噬菌体免疫抗体库中初步获得了特异性抗B型肉毒毒素的Fab抗体.