目的:构建人源日本血吸虫Fab抗体库,筛选出日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定.方法:以3名晚期血吸虫患者切除的脾脏为源,构建人源日本血吸虫Fab抗体库.并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达.结果:构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,库容为4.3 × 106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断.经过5轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取60个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(A3、B6、C4、C17),其中B6经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确.结论:成功构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体B6,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础.
作者:岳国峰;张慧林;焦永军;朱进;冯振卿;管晓虹
来源:南京医科大学学报(自然科学版) 2006 年 26卷 11期