目的:构建天然人源IgG Fab噬菌体抗体库并分析来源于健康人外周血B淋巴细胞的抗体基因可变区的多样性及优势选择.方法:以DNA重组技术从300名健康志愿者的外周血淋巴细胞中扩增出全套人抗体轻链及重链Fd基因,分别插入噬菌体载体pFabICN相应位置,构建天然人源免疫球蛋白G基因文库;进一步从抗体库中随机挑选克隆,获得重轻链基因进行核苷酸序列测定并利用IgBLAST 数据库分析抗体基因可变区的同源家族.结果:从4×108库容的天然人源IgG Fab噬菌体抗体库中随机挑选克隆,对其中32个轻链及重链Fd基因插入正确的克隆进行核苷酸序列测定和氨基酸序列的推算,获得29条彼此完全不同的Fd重链基因及轻链基因.以IgBLAST 数据库比对分析显示29条重链基因的V区分别属于VH3(72.4
作者:邵红霞;章黎;杨彬;冯萌;付永峰;Hiroshi Tachibana;程训佳
来源:中国免疫学杂志 2010 年 26卷 11期