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目的:建立一种检测编码新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1)的细菌耐药基因blaNDM-1的复合探针实时荧光PCR方法.方法:基于复合探针技术原理,以blaNDM-基因作为待检靶基因建立检测方法,对PCR扩增体系中镁离子浓度、PCR退火温度等进行优化,并对检测的灵敏性、特异性、重复性等进行评价.结果:优化了最佳反应体系和扩增条件;以灵敏度质控品进行灵敏度实验,最低检测限可达2拷贝/体系;非耐药性菌株的检测结果均为阴性;批间批内变异系数均小于5%;只有产NDM-1的鲍曼不动杆菌检测为阳性,其他377株临床分离菌和阴性对照均无响应.结论:建立了检测含blaNDM-1基因的菌株的方法,具有很好的灵敏性、特异性和重复性.

作者:吕虹;刘志红;刘琪琦;孙晓彦;陈苏红;王升启

来源:生物技术通讯 2012 年 23卷 3期

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作者:
吕虹;刘志红;刘琪琦;孙晓彦;陈苏红;王升启
来源:
生物技术通讯 2012 年 23卷 3期
标签:
新德里金属β内酰胺酶1 blaNDM-1基因 实时荧光PCR 复合探针 分子诊断技术
目的:建立一种检测编码新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1)的细菌耐药基因blaNDM-1的复合探针实时荧光PCR方法.方法:基于复合探针技术原理,以blaNDM-基因作为待检靶基因建立检测方法,对PCR扩增体系中镁离子浓度、PCR退火温度等进行优化,并对检测的灵敏性、特异性、重复性等进行评价.结果:优化了最佳反应体系和扩增条件;以灵敏度质控品进行灵敏度实验,最低检测限可达2拷贝/体系;非耐药性菌株的检测结果均为阴性;批间批内变异系数均小于5%;只有产NDM-1的鲍曼不动杆菌检测为阳性,其他377株临床分离菌和阴性对照均无响应.结论:建立了检测含blaNDM-1基因的菌株的方法,具有很好的灵敏性、特异性和重复性.