目的 构建辣椒素受体(vanilloid receptor 1,VR1)真核表达载体,用以研究VR1的功能.方法 从大鼠的背根神经节中提取总RNA,逆转录为cDNA,以此为模板,用VR1特异性的引物扩增,随后将PCR产物插入T-easy载体,经酶切鉴定和测序,与GenBank序列比对.再将正确序列亚克隆至表达载体pEGFP-C3并鉴定.运用脂质体转染的方法,将构建好的表达载体pEGFP-C3-VR1转染到人胚胎肾细胞(HEK-293)中,用荧光显微镜观察报告基因绿色荧光蛋白的表达,通过免疫组化的方法确定目的 蛋白VR1的表达.结果 克隆的大鼠VR1核苷酸序列与GenBank公布的序列AB040873和AF029310的编码区同源性分别达到99.92
作者:陈敏;孙丽新;张陆勇
来源:山西医科大学学报 2007 年 38卷 9期