目的构建血管内皮生长因子(VEGF165)真核表达载体,并检测其在鼠心肌细胞中的表达.方法应用DNA重组方法,将编码hVEGF165全长cDNA克隆于真核表达载体pCR3中,构建pCR3.hVEEGF165真核表达载体,使用脂质体包裹的方法将真核表达载体pCR3.hVEGF165转染至培养鼠心肌细胞中,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Southern blot、免疫组织化学染色、酶联免疫吸附测定法检测VEGF165基因在心肌细胞中的表达和分泌.结果将构建好的真核表达载体pCR3.hVEGF165转染心肌细胞后,VEGFmRNA及蛋白水平明显增高.结论成功构建了真核表达载体pCR3.hVEGF165,其转染心肌细胞后能够获得较高水平的VEGF蛋白.
作者：郝亚荣；李建军；李庚山
来源：中华老年心脑血管病杂志 2005 年 7卷 1期
