目的 研究敲低和过表达LDHB(lactate dehydrogenase B)对HeLa细胞生长的影响. 方法 根据慢病毒质粒pLn(pLL3.7-neo)特点,设计三对分别靶向LDHB cDNA 48,201,443位核苷酸序列的shRNA(short hairpin RNA)引物,退火后与pLn重组.同时,将LDHB cDNA与慢病毒质粒pip (pBOBI-IRES-puro)重组,获得的重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,将获得的病毒上清感染HeLa细胞,Western blot鉴定LDHB的敲低和过表达对LDHB蛋白水平的影响,并观察其对HeLa细胞生长的影响. 结果 靶向LDHB第48位核苷酸的shRNA显著敲低LDHB(P＜0.01),443位次之,201位无敲低作用.shRNA序列对HeLa细胞生长的抑制作用与其敲低效果成正相关.转染pIp-LDHB显著升高LDHB在HeLa细胞中的表达水平(P＜0.01),但不影响其生长. 结论 敲低LDHB抑制HeLa细胞生长,下调LDHB的表达可能有助于宫颈癌的治疗.
作者：金科华；刘复兴
来源：山西医科大学学报 2016 年 47卷 1期
