目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical mesenchymal stem cells,hUMSCs)对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19)细胞自噬水平的影响及可能的机制.方法 原代培养hUMSCs,蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定其CD90蛋白的表达.根据不同干预将体外培养的ARPE-19细胞随机分为对照组、高糖组和高糖+hUMSCs组.对照组细胞在无糖培养基中培养,高糖组细胞在培养基中加入25 mmol/L D-葡萄糖(D-glucose)培养,高糖+hUMSCs组将hUMSCs与高糖损伤的ARPE-19细胞Transwell共培养.培养24 h后,采用电镜观察三组细胞内自噬体的超微结构,利用噻唑兰实验(MTT)检测各组RPE细胞增殖水平,Western blot检测各组细胞的细胞自噬标志性蛋白微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-related protein 1 light chain 3B,LC3B)Ⅱ型和Ⅰ型的比值(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ)、Beclin-1、P62及信号通路蛋白mTOR、p-mTOR的表达,酶联免疫吸附试验检测ARPE-19细胞上清液中VEGF的含量.结果 hUMSC的表面标志蛋白CD90呈阳性表达.高糖+hUMSCs组中自噬体的数量明显少于高糖组.与高糖组相比,高糖+hUMSCs组细胞增殖率明显升高(77.82％±3.26％vs 85.19％±2.22％,P=0.007).与对照组相比,高糖组和高糖+hUMSCs组细胞中LC3B-Ⅱ/Ⅰ比值和Beclin-1表达显著增加(均P

作者：闫瑾；李蓉；王莉；张桂鸥；杨扬；刘文兰；朱丹

来源：山西医科大学学报 2021 年 52卷 4期