您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览47 | 下载10

目的 探讨高糖培养的人肾小管细胞HK-2中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CTB-92J24.3对miR-135b-5p表达的调控机制及对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法 以高糖(25 mmol/L葡萄糖)培养人肾小管细胞HK-2,采用慢病毒过表达技术上调HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达作为CTB-92J24.3组,以空载慢病毒感染为control组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达差异.MTT法检测两组HK-2细胞的增殖活性.流式细胞术实验检测两组HK-2细胞的凋亡率.采用miRcode软件预测CTB-92J24.3作用结合的微小RNA(miRNA).采用双荧光素酶报告基因实验验证CTB-92J24.3和下游miRNA之间的结合.qRT-PCR分别检测下游miRNA和miRNA靶基因的表达.Western blot检测miRNA靶基因蛋白、促增殖相关蛋白(CDK2、Cyclin E)及促凋亡相关蛋白(Bax、Bak)的表达.结果 与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中CTB-92J24.3表达显著增加(P<0.01),HK-2细胞增殖活性显著升高(P<0.05),HK-2细胞凋亡显著降低(P<0.01).CTB-92J24.3的靶基因是miR-135b-5p,两者能够互补结合(P<0.01).与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中miR-135b-5p表达降低(P<0.01),miR-135b-5p的靶基因骨成型蛋白7(bone morphogenic protein

作者:沈旭;刘俊;李建新;曾龙;高云;王思佳

来源:山西医科大学学报 2022 年 53卷 5期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:47 | 下载:10
作者:
沈旭;刘俊;李建新;曾龙;高云;王思佳
来源:
山西医科大学学报 2022 年 53卷 5期
标签:
肾小管上皮细胞 CTB-92J24.3 miR-135b-5p 增殖 凋亡
目的 探讨高糖培养的人肾小管细胞HK-2中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CTB-92J24.3对miR-135b-5p表达的调控机制及对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法 以高糖(25 mmol/L葡萄糖)培养人肾小管细胞HK-2,采用慢病毒过表达技术上调HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达作为CTB-92J24.3组,以空载慢病毒感染为control组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达差异.MTT法检测两组HK-2细胞的增殖活性.流式细胞术实验检测两组HK-2细胞的凋亡率.采用miRcode软件预测CTB-92J24.3作用结合的微小RNA(miRNA).采用双荧光素酶报告基因实验验证CTB-92J24.3和下游miRNA之间的结合.qRT-PCR分别检测下游miRNA和miRNA靶基因的表达.Western blot检测miRNA靶基因蛋白、促增殖相关蛋白(CDK2、Cyclin E)及促凋亡相关蛋白(Bax、Bak)的表达.结果 与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中CTB-92J24.3表达显著增加(P<0.01),HK-2细胞增殖活性显著升高(P<0.05),HK-2细胞凋亡显著降低(P<0.01).CTB-92J24.3的靶基因是miR-135b-5p,两者能够互补结合(P<0.01).与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中miR-135b-5p表达降低(P<0.01),miR-135b-5p的靶基因骨成型蛋白7(bone morphogenic protein