目的:研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中羧肽酶抑制剂Latexin的表达变化及其对肺部炎症的影响.方法:建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、24和48 h开胸取出肺组织.常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR的方法研究Latexin在mRNA水平表达的变化;采用Western-blot方法进一步验证Latexin在蛋白水平表达的变化;采用免疫组织化学的方法检测大鼠肺组织中Latexin在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况.分别在大鼠急性肺栓塞后1、8、24和48 h暴露气管,进行支气管肺泡灌洗,支气管肺泡灌洗液(BALF)上清采用放射免疫法(RIA)检测内皮素-1(ET-1)的浓度;采用ELISA法检测白三烯C4(LTC4)的浓度;细胞沉淀用于分离正常大鼠肺泡巨噬细胞(Ams),并进一步用免疫磁珠法纯化Ams.采用半定量RT-PCR和Western blot法检测Ams在急性肺栓塞后不同时间点Latexin及其作用底物羧肽酶A3(CPA3)的表达.结果:在大鼠急性肺栓塞后8h,肺组织内Latexin的mRNA水平和蛋白水平均逐渐升高.免疫组化研究表明急性肺栓塞后Ams在肺泡腔内的浸润增加,Latexin主要表达于Ams.急性肺栓塞大鼠BALF中分离的Ams无论Latexin和CPA3的表达都明显升高.随着Latexin表达的升高,ET-1和LTC4的浓度也随之升高.结论:急性肺栓塞后Ams中L
作者:李圣青;刘阿茹;欧阳海峰;简文;遆新宇
来源:陕西医学杂志 2007 年 36卷 9期