目的：应用慢病毒介导的 RNA 干扰技术，建立稳定表达 siPin1的鼻咽癌细胞株。方法：将对照组病毒液 lv -3和实验组病毒液 siPin1感染 CNE2细胞，通过嘌呤霉素和绿色荧光检测筛选 siPin1稳定细胞株，在荧光显微镜下观察细胞的荧光表达，通过定量 PCR 和 Western blot 鉴定 siPin1细胞 Pin1 mRNA 和蛋白的表达。结果：筛选 siPin1稳定表达细胞株嘌呤霉素筛选浓度为1μg/ ml，病毒感染后超过90％细胞发出绿色荧光，实验组 siPin1与对照组 lv -3相比，Pin1 mRNA 表达水平下降，Western blotting 检测 Pin1蛋白表达明显减少。结论：成功构建 Pin1干扰的稳定表达鼻咽癌细胞株，为后续研究提供工具细胞。
作者：陈华；黄国良；何志巍
来源：现代肿瘤医学 2015 年 7期
