目的:研究miR-147a对脉络膜黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探究其作用机制.方法:采用脂质体转染人脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞,设置miR-NC、miR-147a mimics、inhibitor-NC、miR-147a inhibitor四组.采用EDU染色法检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;Targetscan生物信息学网站预测分析miR-147a下游靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-147 a是否靶向结合MCM3 mRNA 3'UTR区;蛋白质印迹法(Western Blot)检测靶基因MCM3蛋白表达.结果:过表达miR-147a可显著降低MUM-2B细胞的增殖数、迁移数和侵袭数,相反,敲减miR-147a提高细胞增殖数、迁移数和侵袭数.miR-147a直接靶向并负向调控MCM3蛋白表达.沉默MCM3可抑制MUM-2B细胞增殖、迁移和侵袭.结论:miR-147a通过直接靶向MCM3抑制脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞的增殖、迁移和侵袭.miR-147a/MCM3轴可能是治疗脉络膜黑色素瘤的新靶标.
作者:刘然;应曼曼;张晓楠;宁宏
来源:现代肿瘤医学 2021 年 29卷 12期