目的:探究过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)对结肠腺癌细胞凋亡的影响及其机制.方法:收集我院30例结肠腺癌患者的结肠腺癌组织及癌旁组织,实时荧光定量PCR检测组织中TXNIP mRNA表达,免疫组织化学染色检测组织中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与凋亡标志蛋白Cleaved Caspase-3表达;将人结肠腺癌LoVo细胞随机分为对照组、阴性空载体组(LV-GFP)和TXNIP过表达组(LV-GFP-TXNIP),倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,收集转染72 h后的LoVo细胞,通过流式细胞术检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞自噬情况,免疫荧光染色检测细胞中LC3表达,Western blot检测细胞中自噬相关蛋白与凋亡相关蛋白表达变化.结果:与癌旁组织比较,结肠腺癌组织中TXNIP mRNA相对表达量显著降低(P<0.01),LC3-Ⅱ阳性表达率显著升高(P<0.05),Cleaved Caspase-3阳性表达率显著降低(P<0.05);慢病毒转染72 h后转染效率较高(P<0.05);与对照组比较,LV-GFP-TXNIP组LoVo细胞的凋亡率显著增加(P<0.05),细胞质较为致密,自噬体数目明显减少,LC3荧光染色减弱,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著下降(P<0.05),而LC3-I、p62蛋白表达显著增加(P<0.05),同时,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.0
作者:张丽芳;杨婕琳;胡晓利;徐江
来源:现代肿瘤医学 2022 年 30卷 3期