目的 观察过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(Amyloid-beta 1-42,Aβ1-42)诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其机制.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,经Aβ1-42预处理后转染质粒pEGFP-NGB及空载体pEGFP-N1,同时设空白对照组(未转染).MTT法、流式细胞术及JC-1染色法分别检测过表达NGB对Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞存活率、细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,采用相应试剂盒检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3 (caspase 3)、caspase 9、ATP及细胞色素C(cytochrome C,cyto C)氧化酶活性;Western blot法检测细胞中cyto C、凋亡蛋白酶激活因子-1(apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1)、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平.结果 过表达NGB可显著提高Aβ1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞的存活率(P＜0.001)及细胞中cyto C氧化酶、ATP的活性(P＜0.01);可显著抑制损伤细胞的凋亡(P＜0.05)、线粒体膜电位的降低(P＜0.001)及细胞中caspase 3、caspase 9的活性(P＜0.01);可明显降低损伤细胞内cyto C、Apaf-1、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平(P＜0.05).结论 NGB可显著抑制Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤,促进其增殖,其机制可能与NGB恢复线粒体功能及抑制cyto C触发细胞凋亡密切相关.
作者：杨军；张雄
来源：中国生物制品学杂志 2018 年 31卷 3期
