目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其靶基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)在神经元缺氧缺血(HI)后的信号调控机制.方法 将妊娠16～18 d SD大鼠胎鼠的大脑皮层神经元进行原代培养,取培养5 d的神经元建立氧糖剥离(OGD)模型,模拟细胞HI.应用磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(P13K/Akt)信号通路特异性抑制剂wortmannin及LY294002预处理神经元,再进行OGD处理,同时设立对照组.培养的神经元分为4组:OGD后再灌注4 h组、二甲基亚砜(DMSO)对照组、wortmannin干预组及LY294002干预组.采用RT-PCR及免疫细胞化学方法分别测定神经元HIF-1α、VEGF mRNA及蛋白表达水平.结果 OGD再灌注4 h后,wortmannin干预组及LY294002干预组HIF-1α mRNA水平较OGD再灌注4 h组及DMSO对照组明显下降,VEGF mRNA水平亦较OGD再灌注4 h组及DMSO对照组下调;OGD再灌注4 h组HIF-1α mRNA及VEGF mRNA与DMSO对照组比较差异无统计学意义;免疫细胞化学结果显示wortmannin干预组及LY294002干预组HIF-1α、VEGF蛋白表达低于OGD后再灌注4 h组及DMSO对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05),细胞黄棕色着色减弱,阳性细胞数减少.结论 抑制P13K/Akt信号通路后,OGD神经元HIF-1α、VEGF mRNA及其蛋白表达均下降,提示该信号传导通路参与HI后神经元HIF-1α

作者：张莉；屈艺；张晓岚；唐军；李熙鸿；母得志

来源：实用儿科临床杂志 2009 年 24卷 24期