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目的 探讨13-顺式维甲酸(13-cis RA)体外对3种人神经母细胞瘤(NB)细胞株生长的影响及其作用机制.方法 常规培养SH-SY5Y、SK-N-SH和SK-N-BE2细胞株,荧光原位杂交技术(FISH)检测3种细胞MYCN基因扩增情况.不同浓度13-cis RA作用后,采用相差显微镜观察细胞形态变化,酶联免疫吸附法测定细胞培养液神经元特异性烯醇化酶(NSE),细胞增殖毒性检测法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 13-cis RA作用后,3种细胞均伸出多个轴突树突状突起,呈极性化改变,出现细胞分化.FISH检测结果显示,SK-N-BE2细胞为MYCN扩增阳性,13-cis RA作用后MYCN仍扩增阳性,另2种细胞株未见扩增.3种细胞经不同浓度13-cis RA作用后NSE水平随药物作用时间延长而升高,其中SK-N-BE2细胞NSE水平显著升高,差异均有统计学意义(F =27.00,P<0.000 1).13-cis RA作用48 h内均促进细胞增殖,随后转为抑制细胞生长.SH-SY5Y细胞经10 μmol/L 13-cis RA作用96 h及120 h显著增加细胞凋亡(F=16.21,P=0.011;F=16.04,P=0.016);SK-N-SH细胞经1μmol/L及10 μmol/L 13-cis RA作用48 h,细胞凋亡均显著增加(F=15.05,P=0.012;F=31.18,P=0.005);SK-N-BE2细胞经不同浓度13-cis RA(1 μmoL/L、5μmol/L、10 μmol/L)作用120 h细胞凋亡均显著增加(F=9.05,P=0.030;F

作者:邵静波;吴伟;李玲玲;吕志葆

来源:中华实用儿科临床杂志 2015 年 30卷 15期

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作者:
邵静波;吴伟;李玲玲;吕志葆
来源:
中华实用儿科临床杂志 2015 年 30卷 15期
标签:
神经母细胞瘤 诱导分化 13-顺式维甲酸 MYCN基因 Neuroblastoma Differentiation 13-cis retinoic acid MYCN gene
目的 探讨13-顺式维甲酸(13-cis RA)体外对3种人神经母细胞瘤(NB)细胞株生长的影响及其作用机制.方法 常规培养SH-SY5Y、SK-N-SH和SK-N-BE2细胞株,荧光原位杂交技术(FISH)检测3种细胞MYCN基因扩增情况.不同浓度13-cis RA作用后,采用相差显微镜观察细胞形态变化,酶联免疫吸附法测定细胞培养液神经元特异性烯醇化酶(NSE),细胞增殖毒性检测法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 13-cis RA作用后,3种细胞均伸出多个轴突树突状突起,呈极性化改变,出现细胞分化.FISH检测结果显示,SK-N-BE2细胞为MYCN扩增阳性,13-cis RA作用后MYCN仍扩增阳性,另2种细胞株未见扩增.3种细胞经不同浓度13-cis RA作用后NSE水平随药物作用时间延长而升高,其中SK-N-BE2细胞NSE水平显著升高,差异均有统计学意义(F =27.00,P<0.000 1).13-cis RA作用48 h内均促进细胞增殖,随后转为抑制细胞生长.SH-SY5Y细胞经10 μmol/L 13-cis RA作用96 h及120 h显著增加细胞凋亡(F=16.21,P=0.011;F=16.04,P=0.016);SK-N-SH细胞经1μmol/L及10 μmol/L 13-cis RA作用48 h,细胞凋亡均显著增加(F=15.05,P=0.012;F=31.18,P=0.005);SK-N-BE2细胞经不同浓度13-cis RA(1 μmoL/L、5μmol/L、10 μmol/L)作用120 h细胞凋亡均显著增加(F=9.05,P=0.030;F