目的:观察牛磺酸对缺氧/复氧性脑损伤斑马鱼幼鱼脑组织中内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、生长停滞与 DNA 损伤可诱导蛋白34(GADD34)表达及神经细胞凋亡的影响,探讨其脑保护机制。方法将受精后5 d 的斑马鱼幼鱼随机分为对照组、缺氧/复氧模型组(模型组)以及牛磺酸组,每组按造模后不同观察时间点又分为1 h、3 h、6 h、24 h、48 h 5个亚组,每亚组100条。采用荧光原位末端标记法(TUNEL)检测各时间点脑组织细胞凋亡情况,实时荧光定量反转录 PCR 法(qRT-PCR)检测各时间点 GRP78、GADD34 mRNA 水平,采用 Western blot 法检测 GRP78、GADD34蛋白水平。结果1. TUNEL:缺氧/复氧后脑组织细胞凋亡指数(AI)增加,模型组3 h 达高峰,牛磺酸组同时间点低于模型组(1 h:22.83±1.80比30.18±1.81,3 h:23.22±2.46比42.97±4.01,6 h:16.80±1.69比22.97±1.91,P 均﹤0.05)。2. qRT-PCR:GRP78及 GADD34 mRNA 表达在缺氧/复氧后1 h 即上调,模型组1 h 达高峰,同时间点牛磺酸组低于模型组(GRP78 mRNA:1 h:2.35±0.13比5.36±0.35,3 h:3.08±0.33比4.27±0.52,6 h:1.57±0.12比3.00±0.13,P 均﹤0.05;GADD34 mRNA:1 h:5.14±0.55比7.45±0.67,3 h:2.79±0.58比5.83±0.
作者:黄玉莎;程燕;陈小辉;罗济璇;曾成;王斌
来源:中华实用儿科临床杂志 2016 年 31卷 6期