目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)分子信号通路在地塞米松(DEX)抑制嘌呤霉素(PAN)引起足细胞凋亡中的作用.方法 体外培养小鼠肾小球足细胞系,并设立对照组、溶媒溶剂二甲基亚砜(DMSO)组、PAN组、DEX组及PI3K特异性抑制剂LY294002组.采用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光染色检测CD2相关蛋白(CD2AP) mRNA表达水平及细胞内分布情况,激光共聚焦检测其与p85的共定位分布的情况;Western blot检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、糖原合成酶激酶-3β(GSK3β)和磷酸化GSK3β(p-GSK3β)的表达.结果 PAN组各时间点(8h、24 h、48 h)CD2AP mRNA (1.11±0.16、0.78±0.09、0.56±0.43)显著低于对照组(1.90±0.26、2.09±0.12、2.28 ±0.95),差异均有统计学意义(均P＜0.05),CD2AP蛋白呈均匀细丝状分布于胞质足突并在细胞核内转变为不连续粗颗粒状集中分布于核周,CD2AP与p85在细胞核膜、细胞质及细胞膜均匀的重叠转变为核内增多的强荧光信号的重叠;DEX组各时间点(8h、24h、48 h)CD2AP mRNA(1.53±0.14、2.15 ±0.27、2.13±0.15)显著高于PAN组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),CD2AP蛋白在细胞膜、胞质的分布密度、分布范围大于PAN组,与p85其重叠荧光信号向核内积聚明显减轻;PAN刺激足细胞15 min后p-Akt蛋白表达水

作者：何绍平；于力；于生友；郝志宏；张瑶

来源：中华实用儿科临床杂志 2017 年 32卷 9期