目的 构建HCV感染相关干扰素IFNL4蛋白融合His标签的真核表达载体,并将其在293-T细胞中表达后进行初步纯化鉴定.方法 采用PCR法从含人IFNL4基因序列的质粒pFC14A-p179中扩增出目的片段,将其定向连接到pcDNA3.1-His真核表达载体中,经酶切和测序鉴定正确后,以脂质体法转染293-T细胞,培养72 h后裂解细胞,采用抗His-Tag抗体行蛋白质印迹法检测目的蛋白的表达.结果 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-IFNL4-His,转染后经Western blot法检测显示20 kDa位置有目的蛋白条带,大小与目的蛋白相符.结论 我们成功构建了HCV感染相关IFNL4与His标签融合的真核表达载体,体外转染293-T细胞后鉴定其工作良好,为后续对干扰素在HCV感染及抗肝纤维化治疗中的研究奠定了基础.
作者：徐溪；党引利；吴朔
来源：实用肝脏病杂志 2018 年 21卷 6期
