目的 建立一种简便高效的定向诱导小鼠胚胎干细胞向Ⅱ型肺泡细胞分化的方法.方法 ①通过细胞培养,获得充足小鼠胚胎干细胞,接种于小鼠胚胎成纤维细胞滋养层上,通过滋养层细胞以及白血病抑制因子来保持其多向分化能力.②STLV型生物反应器中培养的拟胚体在细胞大小、形态和数量方面均明显优于传统的悬浮培养法.③将STLV型生物反应器中制备并扩增得到的拟胚体,用ESC分化培养基连续贴壁诱导14d后,进行细胞染色,聚合酶链式反应检测.结果 通过3个部分的实验,最终得到表达Ⅱ型肺泡细胞特异性标志物的细胞.前两部分中,得到了大量状态良好的未分化ESC,经扩增获得了高质量和大数量的EBS.在第三部分,免疫荧光及RT-PCR证明出现了Ⅱ型肺泡细胞特异性标志物-SPC的表达.结论 通过以胚胎成纤维为种子细胞,利用组织工程的技术可形成Ⅱ型肺泡细胞.
作者：范微微；李惠；范巨峰；周璐；侯莹；吕伟；张岩崑
来源：中国美容整形外科杂志 2012 年 23卷 8期
