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目的 探讨HIF-1 α基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(matrix metalloproteinase inhibitor,TIMP1)表达的影响.方法 将siRNA-HIF-1α质粒载体稳定转染至A549细胞中,于缺氧环境下培养.应用MMT法和Transwell试验分别检测转染细胞的增殖、迁移和侵袭能力.应用qRT-PCR和蛋白免疫印迹分别检测转染细胞内TIMP1、MMP1 mRNA和蛋白表达水平.结果 与Control组相比,A549组HIF-1 αmRNA和蛋白表达显著增加(均P<0.05).与Blank组和si-NC组相比,si-HIF-1α组HIF-1α mRNA表达水平显著降低(P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组在转染24、48和72 h后细胞增殖率均显著降低(均P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组A549细胞在转染24 h后的迁移和侵袭数量均显著降低(P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组细胞内MMP1表达水平显著降低,而TIMP1表达水平显著增加(均P<0.05).结论 在缺氧状态下,HIF-1 αsiRNA靶向沉默HIF-1α在A549细胞内的表达,并可以通过下调MMP1表达和上调TIMP1的表达而抑制细胞的增殖、迁移和侵袭.

作者:王良梅;司进;周萍;李丽霞

来源:中华全科医学 2018 年 16卷 3期

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作者:
王良梅;司进;周萍;李丽霞
来源:
中华全科医学 2018 年 16卷 3期
标签:
非小细胞肺癌细胞株A549 缺氧诱导因子-1α 基因沉默 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶抑制剂1
目的 探讨HIF-1 α基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC) A549细胞基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(matrix metalloproteinase inhibitor,TIMP1)表达的影响.方法 将siRNA-HIF-1α质粒载体稳定转染至A549细胞中,于缺氧环境下培养.应用MMT法和Transwell试验分别检测转染细胞的增殖、迁移和侵袭能力.应用qRT-PCR和蛋白免疫印迹分别检测转染细胞内TIMP1、MMP1 mRNA和蛋白表达水平.结果 与Control组相比,A549组HIF-1 αmRNA和蛋白表达显著增加(均P<0.05).与Blank组和si-NC组相比,si-HIF-1α组HIF-1α mRNA表达水平显著降低(P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组在转染24、48和72 h后细胞增殖率均显著降低(均P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组A549细胞在转染24 h后的迁移和侵袭数量均显著降低(P<0.05).与Blank组相比,si-HIF-1α组细胞内MMP1表达水平显著降低,而TIMP1表达水平显著增加(均P<0.05).结论 在缺氧状态下,HIF-1 αsiRNA靶向沉默HIF-1α在A549细胞内的表达,并可以通过下调MMP1表达和上调TIMP1的表达而抑制细胞的增殖、迁移和侵袭.