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目的 在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性. 方法 将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体pET-DsbC中,然后进行融合蛋白DsbC-Rv3425表达并实现亲和纯化,用Western-blot分析其抗原性和特异性. 结果 Rv3425基因在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和纯化的DsbC-Rv3425蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应. 结论 DsbC-Rv3425蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达形式存在,具有较好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值.

作者:孙卫国;张灵霞;熊志红;杨秉芬;程小星

来源:实用预防医学 2014 年 21卷 12期

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作者:
孙卫国;张灵霞;熊志红;杨秉芬;程小星
来源:
实用预防医学 2014 年 21卷 12期
标签:
结核分枝杆菌 Rv3425蛋白 表达 Mycobacterium tuberculosis Protein Rv3425 Expression
目的 在原核系统内获得结核分枝杆菌Rv3425蛋白可溶性表达并进行纯化,Western-blot技术初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性. 方法 将Rv3425核酸编码序列克隆至融合表达载体pET-DsbC中,然后进行融合蛋白DsbC-Rv3425表达并实现亲和纯化,用Western-blot分析其抗原性和特异性. 结果 Rv3425基因在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和纯化的DsbC-Rv3425蛋白与结核病患者血清标本呈强阳性反应,与健康人血清标本呈阴性反应. 结论 DsbC-Rv3425蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达形式存在,具有较好的抗原特异性和免疫原性,对结核病诊断有潜在的应用价值.