目的:对首次利用狗肾传代细胞(MDCK)分离流感病毒进行总结,摸索流感病毒细胞培养分离技术,积累分离的经验,提高流感监测水平。方法:培养MDCK细胞,并接种61例经咸阳市疾病预防控制中心流感网络实验室PCR检测为阳性的标本,收集病变细胞,经红细胞凝集实验、红细胞凝集抑制实验进行流感病毒毒株鉴定,同时在培养液中加入不同浓度谷氨酰胺以研究谷氨酰胺对MDCK细胞生长的影响。结果:从61例实时荧光定量PCR检测阳性流感病例标本中分离出25株流感毒株,HA滴度均≥1∶16,血凝抑制实验(HI)结果显示HI效价均≥1∶640,其中18株为A(H3N2)亚型株,7株为A(H1N1)亚型株;谷氨酰胺浓度降至0.1%以下时,细胞生长速率低,细胞培养至48 h活性即开始下降。结论:利用MDCK细胞培养分离流感病毒在咸阳市取得成功,并发现谷氨酰胺浓度对MDCK细胞的活性和细胞凋亡有着显著的影响。
作者:张俊君;张燕丽;秦龙;魏战峰
来源:实用医学杂志 2014 年 5期