目的 优化甲、乙型流感病毒在MDCK细胞上的培养条件,提高流感病毒的分离效果.方法 将5种流感病毒液(甲型流感病毒:甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2和乙型流感病毒:Victoria、Yamagata)分别接种于MDCK细胞,通过比较不同的病毒接种量(30μl/cm2、60 μl/cm2、90 μl/cm2、120 μl/cm2、150 μl/cm2)、不同的病毒孵育时间(0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、2.5 h、3.0 h)、不同的TPCK-胰酶添加浓度(1.0 μg/ml、2.0 μg/ml、3.0 μg/ml、4.0 μg/ml、5/0μ∥ml)以及不同的MDCK细胞增毒代次(连续盲传5代)对5种流感病毒易感性的影响,确定其最佳分离效果;对分离后的病毒以红细胞凝集(HA)方法检测病毒滴度,结果 通过对比病毒HA滴度结果,5种流感病毒(甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2、Victoria和Yamaga)的最佳病毒接种量分别为:90μl/cm2、90μl/m2、60μl/cm2、120 μl/cm2、120 μl/cm2;最佳病毒孵育时间:甲型流感病毒为1.0～1.5 h,乙型流感病毒为2.0～2.5 h;胰酶最佳使用浓度分别是:2.0 μg/ml、2.0 μg/ml、2.0 μg/ml、3.0 μg/ml、3.0 μg/ml;最适宜的细胞增毒传代次数为:1代、3代、2代、2代、2代;甲型流感病毒经培养后病毒的HA滴度低于乙型流感,甲型H1N1流感病毒经培养后HA滴度较低.结论 甲型流感病毒对MD

作者：周大宇；李春；赵晓辉；孙佩龙；张旭；毛玲玲

来源：现代预防医学 2015 年 42卷 18期