目的 优化甲型流感病毒在MDCK细胞上的培养条件,提高甲型流感病毒的分离率和监测效果.方法 将三种甲型流感病毒液(甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3 N2)分别接种于MDCK细胞,通过比较不同的病毒接种量(25、50、75、100、125和150 μl/cm2)、不同的TPCK-胰酶添加浓度(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0和3.5μg/ml)以及不同的MDCK细胞增毒代次(连续盲传四代),对三种甲型流感病毒易感性的影响,确定其最佳分离效果.结果 三种甲型流感病毒:甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2的最佳病毒接种量分别为:100、75和75 μl/cm2;胰酶最佳使用浓度分别为2.5、2.0和2.0 μg/ml;最适宜的细胞增毒传代次数为:一代、二代、二代;低代次的MDCK细胞对甲型H1N1流感病毒的易感性高于季节性H1N1和季节性H3N2;甲型H1N1流感在培养后病毒的HA滴度低于季节性H1N1与季节性H3N2.结论 甲型H1N1流感病毒在MDCK细胞上的分离效果低于季节性H1N1与季节性H3N2;季节性H1N1流感病毒和季节性H3N2流感病毒的分离条件基本相同.
作者:赵晓辉;周大宇
来源:卫生研究 2014 年 43卷 2期