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目的:观察小干扰 RNA(siRNA)沉默 Nanog 基因对人肺腺癌 A549 细胞迁移及侵袭能力的影响. 方法:将 A549 细胞分为空白对照组(A549)、阴性对照组(siNC)及实验转染组(siNanog). 以脂质体Lipofectamine2000 将Nanog 基因特异性siRNA 转染A549 细胞;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和West-ern blot方法检测特异性siRNA 对Nanog 基因在mRNA和蛋白水平沉默效果;以细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测干扰Nanog 基因前后A549 细胞迁移及侵袭能力的改变. 结果:RT-PCR 及 Western blot 分别显示A549-siNanog 组细胞中 Nanog 基因 mRNA 及蛋白表达(0.40 ± 0.06 及 0.50 ± 0.03)较 siNC 对照组(0.97 ± 0.03 及0.85 ± 0.02)明显下降(P < 0.05);细胞划痕及 Transwell 侵袭实验分别显示 A549-siNanog 组细胞迁移能力及侵袭能力[(57 ± 0.04)

作者:王金娜;王锦光;赵磊

来源:实用医学杂志 2015 年 31卷 15期

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作者:
王金娜;王锦光;赵磊
来源:
实用医学杂志 2015 年 31卷 15期
标签:
肺腺癌 Nanog基因 小片段RNA 侵袭 Lung adenocarcinoma Nanog Small interferingRNA Invasion
目的:观察小干扰 RNA(siRNA)沉默 Nanog 基因对人肺腺癌 A549 细胞迁移及侵袭能力的影响. 方法:将 A549 细胞分为空白对照组(A549)、阴性对照组(siNC)及实验转染组(siNanog). 以脂质体Lipofectamine2000 将Nanog 基因特异性siRNA 转染A549 细胞;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和West-ern blot方法检测特异性siRNA 对Nanog 基因在mRNA和蛋白水平沉默效果;以细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测干扰Nanog 基因前后A549 细胞迁移及侵袭能力的改变. 结果:RT-PCR 及 Western blot 分别显示A549-siNanog 组细胞中 Nanog 基因 mRNA 及蛋白表达(0.40 ± 0.06 及 0.50 ± 0.03)较 siNC 对照组(0.97 ± 0.03 及0.85 ± 0.02)明显下降(P < 0.05);细胞划痕及 Transwell 侵袭实验分别显示 A549-siNanog 组细胞迁移能力及侵袭能力[(57 ± 0.04)