目的 探讨miR-451a通过调控PI3K/Akt通路对食管鳞状细胞癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药的作用及其可能机制.方法 人正常食管鳞状上皮细胞系Het-1A、人食管鳞状细胞癌细胞系Eca109、人食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系Eca109/DDP,采用实时荧光定量PCR法检测3种细胞miR-451a相对表达量,采用Western blot法检测3种细胞KIF2A蛋白相对表达量.对数生长期Eca109/DDP细胞分为空白对照组(不进行转染操作)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-451a模拟物组(转染miR-451a模拟物),采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞miR-451a相对表达量,采用Western blot法检测3组细胞KIF2A蛋白相对表达量.采用荧光素酶报告实验检测miR-451a和KIF2A的靶向关系.对数生长期Eca109/DDP细胞再分为对照组(不进行转染操作)、miR-NC+ oe-NC组(转染miR-NC+ oe-NC)、miR-451a模拟物+oe-NC组(转染miR-451a模拟物+oe-NC)、miR-451a模拟物+oe-KIF2A组(转染miR-451a模拟物+ oe-KIF2A),4组细胞分别加入不同浓度DDP,采用CCK-8实验检测细胞活力及DDP对细胞的半数抑制浓度,确定DDP在后续实验中的浓度.采用实时荧光定量PCR法检测4组细胞miR-451a相对表达量,采用Western blot法检测4组细胞KIF2A、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量,比较p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt,采

作者：刘曦；王海东；吴蔚；邱阳；廖克龙；谭文锋；张世新；唐猛

来源：中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 2期