目的 构建肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)小鼠及细胞模型,观察NOL1/NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NOL1/NOP2/Sun domain family member 2,Nsun2)表达变化,探讨Nsun2在肾脏IRI中的作用.方法 雄性C57BL/6N小鼠12只,随机分为IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组和假手术组各3只.使用无损伤显微血管夹夹闭小鼠肾蒂使肾脏缺血30 min,随后移除血管夹恢复肾脏血流,IRI-3组、IRI-6组、IRI-24组分别再灌注3、6、24 h;假手术组仅做手术切口和缝合,不做其他处理.IRI-3组、IRI-6组和IRI-24组小鼠分别于再灌注3、6、24 h时,假手术组小鼠于再灌注24 h时检测血肌酐水平.取血后处死小鼠取左肾组织,行HE染色检测4组肾脏组织病理变化,行免疫荧光染色检测IRI-24组和假手术组肾脏组织Nsun2表达,采用Western blot法检测4组肾脏组织Nsun2、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)相对表达量.取人近端肾小管上皮HK-2细胞,分别应用0、100、200 μmol/L CoCl2处理24 h后更换正常培养基继续培养2 h,采用Western blot法检测Nsun2、Bax、Bcl-2蛋白相对表达量,确定构建IRI细胞模型的CoCl2处理最适宜浓度为200 μmol/L.取HK-2细胞分为siRNA-NC 组、siRNA-Nsun2

作者：甘玉金；刘文娜；王利蒙；张丽娜；杨苗苗；曹慧霞；阎磊；王雁良；邵凤民

来源：中华实用诊断与治疗杂志 2022 年 36卷 5期