目的 观察三氧化二砷(As2O3)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制情况及对STMN1表达的影响,探讨沉默STMN1表达对HepG2细胞凋亡的促进作用.方法 取对数生长期HepG2细胞,应用0、0.5、1、2、5、10 μmol/L浓度的As2O3处理48 h,采用MTT法测定细胞增殖率,计算As2O3对HepG2细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50);不同浓度As2O3处理48、72、120 h取细胞,采用实时荧光定量PCR法检测STMN1 mRNA相对表达量.取对数生长期HepG2细胞分为实验组和对照组,实验组应用IC50浓度(7.212μmol/L)的As2O3处理,对照组仅更换培养基,处理48 h时采用Western blot法检测STMN1蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞凋亡.取对数生长期HepG2细胞分为转染组(转染STMN1-siRNA)和阴性对照组(转染NC-siRNA),转染48 h采用实时荧光定量PCR法检测STMN1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测STMN1、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞凋亡;转染12、24、48、72 h时采用MTT法检测细胞增殖.结果 (1)0、0.5、1、2、5、10 μmol/L浓度As2O3 处理 48 h,HepG2 细胞增殖率[1、(0.89±0.06)％、(0.87±0.59)％、(0.73±0.02)％、(0.53±0.02)％、(0.47± 0.01)％]比较差异有统计学意义(F=131.90,P＜0.001).

作者：孙涛；余祖启；张劲夫；范正军；黄娟；赵龙栓

来源：中华实用诊断与治疗杂志 2023 年 37卷 7期